【產品描述】

PEI是一種高電荷陽離子聚合物，易結合負電荷的核酸分子形成復合物，由此介導核酸進入細胞中。PEI用于核酸轉染具有高效、成本低、穩定等特點，適用于HEK293、CHO等多種細胞系的瞬時轉染或穩定轉染。本產品分子量為40,000Da，外觀為白色至灰白色固體。

【儲存條件】

4℃保存，有效期兩年。

【使用方法】

l  溶解配制

1.將10mg PEI粉末加入8ml超純化水中，用2N鹽酸調節pH至3.0±0.1，72℃攪拌溶解（約5min）；

2.用2N氫氧化鈉溶液調節pH為7.0±0.1，加水定容至10ml；

3.用0.1~0.2um無菌過濾器過濾除菌，即得到1mg/ml的儲存液；

4.分裝并儲存在4℃，3個月內穩定；-20℃長期儲存，有效期1年，避免反復凍融。

l  細胞轉染

1.轉染前一天鋪板細胞，以轉染時細胞匯合度到70%-80%為宜，并更換成新鮮的完全培養液；

2.準備DNA-PEI復合物：用不含血清的培養基稀釋DNA至濃度為20ng/ul，取適量PEI加入DNA溶液中（建議DNA和PEI的質量比控制在1:1~1:3），室溫孵育15-30min，形成DNA-PEI復合物。

3.直接將DNA-PEI復合物加入細胞中，輕輕混勻，繼續培養4h-6h后更換含血清的培養基。

4.對于瞬時轉染，通常在轉染后24-48小時后檢測產物表達；對于穩定轉染，12-24小時后傳代并進一步通過篩選培養基培培養獲得穩定整合的細胞克隆。

【參考用量】

針對不同培養皿，您可以參考下表制備轉染復合物，但最佳轉染條件往往需要更多比例的測試。

實例 利用Seebio? 線性聚乙烯亞胺轉染CHO-K1

? 細胞類型：CHO-K1

? 轉染時間：48h

? DNA：eGFP/RFP雙表達質粒

? DNA/PEI=1：2

【注意事項】

本產品僅限于科學研究用，不得用于食品或藥品。請穿著實驗服并穿戴一次性手套操作。