PNGase F重組糖苷酶
- 別名：N-糖酰胺酶F； 肽N-糖苷酶 F； 去糖基化酶
- 編碼：ECE0441D
- 級別：高純級
- 簡介：PNGase F是一種酰胺酶，切割糖蛋白上的N-連接糖，切割的糖型有：高甘露糖、雜合和復雜寡糖，切割位點為：內側的N-乙酰葡糖胺（GlcNAc）和天冬酰胺之間。應用于抗體和糖蛋白的N-糖基去除
基礎信息
| CAS | 83534-39-8 |
| 來源 | 伊麗莎白菌 E.coli重組表達 |
| 純度 | >95% |
| 酶存儲緩沖液 | 儲存液：20 mM Tris-HCl，50 mM NaCl，5 mM EDTA，50% Glycerol，pH 7.5 @ 25°C |
| 組成成分 | PNGase F；10×變性緩沖液；10×糖苷酶緩沖液；10%NP-40 |
| 存儲溫度 | -20℃ |
| 有效期 | 12個月 |
| 應用 | 抗體和糖蛋白的N-糖基去除 |
產品介紹
PNGase F是一種酰胺酶，切割糖蛋白上的N-連接糖，切割的糖型有：高甘露糖、雜合和復雜寡糖，切割位點為：內側的N-乙酰葡糖胺（GlcNAc）和天冬酰胺之間。使得糖蛋白釋放以天冬酰胺連接的糖分子，并使得天冬酰胺轉化為天冬氨酸本公司PNGase是E.coli重組表達，并經多步純化制備的重組蛋白。可以提供不含甘油形式，便于在HPLC方法中取得較好作用。
【酶活定義】 一個單位是指10μL的反應體系中，37°℃反應1小時從10μg變性RNase B中除去超過95%的碳水化合物所需要的酶量。
【產品組分】
PNGase F；10×變性緩沖液；10×糖苷酶緩沖液；10%NP-40
【使用方法 僅供參考】
變性酶切
1、制備變性糖蛋白 2-20μg糖蛋白，2μl 10×糖蛋白變性Buffer，并用去離子水定溶至20μl，100度加熱10 min變性糖蛋白，然后放在冰上冷卻5 min，離心10秒。
2、去離子水溶解2-20μg變性糖蛋白，加入2μl 10×糖苷酶切緩沖液，2μl 10% NP40，500-1000U PNGase F，并用去離子水定溶至20μl。37°℃孵育1h，75℃×15min失活酶，進行SDS-PAGE或HPLC分析。
非變性酶切
去離子水溶解一定量糖蛋白，加入2μl 10×糖苷酶切緩沖液，500-1000U PNGase F，并用去離子水定溶至20μl，37°℃孵育4h-24h，75℃×15min失活酶，進行SDS-PAGE或HPLC分析。
質量指標
MSDS
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