Seebio? 熱啟動Taq酶探針法qPCR預混液(2X)
- 別名：Seebio?Hot Star TaqMan Probe qPCR Master Mix(2X)(Universal)
- 編碼：DAA1098A
- 級別：
- 簡介：Seebio? 熱啟動 Taq 探針法 qPCR預混液(2X) 利用了一種性能增強的Taq DNA聚合酶，通過熱啟動激活技術進行保護，并優化了qPCR緩沖系統來更有效進行基于探針法的定量PCR。本混合物在2倍反應濃度下制備，可直接用于穩健、低模板的定量PCR，具有高靈敏度、特異性和可靠性。
基礎信息
| 中文名 | Seebio?熱啟動Taq酶探針法qPCR預混液(2X) |
| 英文名 | Seebio?Hot Star TaqMan Probe qPCR Master Mix(2X)(Universal) |
產品介紹
【產品基本信息用途】
Seebio? 熱啟動 Taq 探針法 qPCR預混液(2X) 利用了一種性能增強的Taq DNA聚合酶，通過熱啟動激活技術進行保護，并優化了qPCR緩沖系統來更有效進行基于探針法的定量PCR。本混合物在2倍反應濃度下制備，可直接用于穩健、低模板的定量PCR，具有高靈敏度、特異性和可靠性。
【產品特點和優勢】
2 所用Taq DNA聚合酶經改構和優化，具有熱啟動、更高靈敏性和更高可靠性；
2 優化的擴增緩沖系統，保障高的擴增信號強度和低模板有效擴增；
2 2×預混液使反應液配制更方便快捷。
【運輸、儲存條件和有效期】
干冰運輸。-20℃保存，有效期2年
【必備主要試劑和儀器】
1.Real Time PCR 擴增儀
2.實驗專用反應管或反應板
3.PCR 引物和熒光探針
4.滅菌水
5.微量移液器和槍頭（已高壓滅菌）
6.ABI 7300/7500/7500 F/StepOnePlus等擴增儀需ROX Reference Dye。
【使用方法】
1. 配制qPCR反應混合液
組分 | 體積（μl/rxn） | 終濃度 |
2×探針法 qPCR預混液 | 10 | 1× |
模板 | 可變 | 1-100ng |
正向引物（5μM） | 1 | 0.2-1μM |
反向引物（5μM） | 1 | 0.2-1μM |
熒光探針 | 1 | 0.1~0.5μM |
Rox reference Dye（50×） | 按儀器需要 | 1× |
dH2O | 至終體積20 | - |
總體積 | 20 | - |
2. qPCR程序設定
本試劑盒可應用于兩步和三步qPCR程序。如果擴增效率較差，則可以延長熱啟動時間，可以降低退火溫度或增加延長時間。如果擴增特異性較差，則可以適當地提高退火溫度。
二步法 | 變性 | PCR（40 cycles） | 融解曲線 (1 cycle) | |||
變性 | 退火/延申 | |||||
溫度 | 95℃ | 95℃ | 60℃ | 95℃ | 60℃ | 95℃ |
時間 | 30s~10min | 15s | 30~60s | 15s | 60s | 15s |
三步法 | 變性 | PCR（40 cycles） | 融解曲線 (1 cycle) | ||||
變性 | 退火 | 延申 | |||||
溫度 | 95℃ | 95℃ | 50~60℃ | 72℃ | 95℃ | 60℃ | 95℃ |
時間 | 30s~10min | 15s | 30s | 30s | 15s | 60s | 15s |
3. 結果分析
擴增曲線：CT值范圍一般為15~35，20~28的范圍較好。如果CT值過低，則增加模板的稀釋率。如果CT值過高，則提高模板或引物的濃度，甚至調整qPCR程序。
質量指標
MSDS
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