Seebio? 熱啟動 Taq SYBR Green qPCR預(yù)混液(2X)
- 別名：Seebio?Hot Star TaqMan SYBR Green qPCR Master Mix(2X)(Universal)
- 編碼：DAA1097A
- 級別：
- 簡介：Seebio? 熱啟動 Taq SYBR Green qPCR預(yù)混液(2X) 利用了一種性能增強(qiáng)的Taq DNA聚合酶，通過熱啟動激活技術(shù)進(jìn)行保護(hù)，并優(yōu)化了qPCR緩沖系統(tǒng)來進(jìn)行基于SYBR Green I的定量PCR。本混合物在2倍反應(yīng)濃度下制備，可直接用于穩(wěn)健、低模板的定量PCR，具有高靈敏度、特異性和可靠性。
基礎(chǔ)信息
| 中文名 | Seebio? 熱啟動 Taq SYBR Green qPCR預(yù)混液(2X) |
| 英文名 | Seebio?Hot Star TaqMan SYBR Green qPCR Master Mix(2X)(Universal) |
產(chǎn)品介紹
【產(chǎn)品基本信息用途】
Seebio? 熱啟動 Taq SYBR Green qPCR預(yù)混液(2X) 利用了一種性能增強(qiáng)的Taq DNA聚合酶，通過熱啟動激活技術(shù)進(jìn)行保護(hù)，并優(yōu)化了qPCR緩沖系統(tǒng)來進(jìn)行基于SYBR Green I的定量PCR。本混合物在2倍反應(yīng)濃度下制備，可直接用于穩(wěn)健、低模板的定量PCR，具有高靈敏度、特異性和可靠性。
【產(chǎn)品特點和優(yōu)勢】
2 所用Taq DNA聚合酶經(jīng)改構(gòu)和優(yōu)化，具有熱啟動、更高靈敏性和更高可靠性；
2 優(yōu)化的擴(kuò)增緩沖系統(tǒng)，保障高的擴(kuò)增信號強(qiáng)度和低模板有效擴(kuò)增；
2 2×預(yù)混液使反應(yīng)液配制更方便快捷。
【運(yùn)輸、儲存條件和有效期】
干冰運(yùn)輸。-20℃保存，有效期2年
【必備主要試劑和儀器】
1.Real Time PCR 擴(kuò)增儀
2.實驗專用反應(yīng)管或反應(yīng)板
3.PCR 引物
4.滅菌水
5.微量移液器和槍頭（已高壓滅菌）
6.ABI 7300/7500/7500 F/StepOnePlus等擴(kuò)增儀需ROX Reference Dye。
【使用方法】
1. 配制qPCR反應(yīng)混合液
組分 | 體積（μl/rxn） | 終濃度 |
2×SYBR Green qPCR預(yù)混液 | 10 | 1× |
模板 | 可變 | 1-100ng |
正向引物（5μM） | 1 | 0.2-1μM |
反向引物（5μM） | 1 | 0.2-1μM |
Rox reference Dye（50×） | 按儀器需要 | 1× |
dH2O | 至終體積20 | - |
總體積 | 20 | - |
2. qPCR程序設(shè)定
本試劑盒可應(yīng)用于兩步和三步程序，三步法更好。如果擴(kuò)增效率較差，則可以延長熱啟動時間，可以降低退火溫度或增加延長時間。如果擴(kuò)增特異性較差，則可以適當(dāng)?shù)靥岣咄嘶饻囟取?/span>
二步法 | 變性 | PCR（40 cycles） | 融解曲線 (1 cycle) | |||
變性 | 退火/延申 | |||||
溫度 | 95℃ | 95℃ | 60℃ | 95℃ | 60℃ | 95℃ |
時間 | 30s~10min | 15s | 30~60s | 15s | 60s | 15s |
三步法 | 變性 | PCR（40 cycles） | 融解曲線 (1 cycle) | ||||
變性 | 退火 | 延申 | |||||
溫度 | 95℃ | 95℃ | 50~60℃ | 72℃ | 95℃ | 60℃ | 95℃ |
時間 | 30s~10min | 15s | 30s | 30s | 15s | 60s | 15s |
3. 結(jié)果分析
擴(kuò)增曲線：CT值范圍一般為15~35,20~28的范圍較好。如果CT值過低，則增加模板的稀釋率。如果CT值過高，則提高模板或引物的濃度，甚至調(diào)整qPCR程序。融解曲線：通常只有當(dāng)融解曲線為單峰時，才能得到定量結(jié)果。如果在融解曲線上有多個峰，則需要優(yōu)化條件，如重新設(shè)計引物。
質(zhì)量指標(biāo)
MSDS
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