E. coli Poly(A) Polymerase

  • 別名：加尾酶
  • 編碼：ECE0567B
  • 級別：GMP Grade
  • 簡介：通過加尾酶在mRNA 3' 末端引入Poly A尾，可增加mRNA的穩定性，增加mRNA翻譯效率。使用加尾酶引入的Poly A尾的優勢是簡便易行，避免在質粒構建時引入過多的連續T堿基造成的質粒不穩定等問題。
品牌 貨號 包裝規格 庫存 價格 數量
Seebio ECE0567B-100U 100U 有 面議
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Seebio ECE0567B-500U 500U 有 面議
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試用申請 大包裝定制

基礎信息

來源大腸桿菌大規模發酵表達
級別GMP Grade
應用克隆或親和純化

產品介紹

產品描述:
通過加尾酶在mRNA 3' 末端引入Poly A尾，可增加mRNA的穩定性，增加mRNA翻譯效率。使用加尾酶引入的Poly A尾的優勢是簡便易行，避免在質粒構建時引入過多的連續T堿基造成的質粒不穩定等問題。
E. coli Poly (A) Polymerase 不依賴模板的存在，可以催化 ATP 以 AMP 的形式依次摻入到 RNA 的 3′末端，即在 RNA 的 3′末端加多聚 A 尾。Poly (A) 聚合酶具有很高的加尾效率，可以在 RNA 的 3′末端加入 20~200 個 A 堿基。Poly (A)結構有助于提高 mRNA 的翻譯效率。
本制品利用大腸桿菌大規模發酵表達，采用藥用規格原輔料生產，并嚴格控制宿主蛋白質殘留、核酸殘留等，符合 GMP 規范的產品生產與質量管理規程保障生產過程及所有原輔料可追溯。
遵循以下規范生產：

ISO 9001:2015, certified facility
USP Chapter <1043>, Ancillary Materials for Cell, Gene, and Tissue-Engineered Products
USP Chapter <92>, Growth Factors and Cytokines Used in Cell Therapy Manufacturing
Ph. Eur. General Chapter 5.2.12, Raw Materials of Biological Origin for the Production of Cell-based and Gene Therapy Medicinal Products

產品用途：
1.  用于 RNA 3′末端標記。
2.  為 RNA 添加 Poly(A)尾，用于克隆或親和純化。比如將 miRNA 添加 Poly (A)，為 cDNA 合成提供 oligo-dT 引物結合位點。
3.  提高 RNA 在真核細胞中的翻譯效率。
活性定義：
在 37℃條件下，10 min 內將1 nmol AMP 摻入到 RNA 所需的酶量定義為 1 個活性單位（U）。 
保存體系：
20mM Tris-HCl; 300mM NaCl; 1mM DTT; 1mM EDTA; 0.1%TritonX-100; 50% (v/v) Glycerol, pH7.5。 
保存溫度：
-20±5 ℃。
注意事項：
1. 熱失活條件：65℃，20 min。
2. 該酶只能以 RNA 為底物。
3. 該酶將 AMP 添加到 RNA 的3′末端具有較高的選擇性，并不會在所有 RNA 分子中添加相同長度的 Poly (A)。
4. 該酶使用 M-MuLV 逆轉錄酶反應緩沖液，也可以進行反應。
5. 該酶需要 Mg2+等二價陽離子才具有活性。
6. RNA 加 A 尾長度受酶量、ATP 和反應時間等因素影響，不同的實驗需要加 A 的量會有所不同，可通過減少反應時間來調整加 A 的長度，該酶在 37°C 反應 30 分鐘時可加約 30 個 A 堿基，1 小時可加約 100 個 A 堿基。
7. EDTA 抑制該酶活性。若停止反應，可通過添加 EDTA 至終濃度 10mM，或直接對其進行純化。


質量指標

MSDS

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