X-Gal是β-半乳糖苷酶的發色底物，可產生豐富的藍色，與背景相比可以直觀地檢測到。 X-Gal是lac+基因型重組細菌菌落藍白斑篩選的良好基質。

X–gal是β–半乳糖苷酶（β–galactosidase）的底物，水解后呈藍色。基于這個特點，pUC系列載體DNA（或其他帶有lacZ基因載體DNA）以lacZ 缺失細胞為宿主進行轉化時、或用M13噬菌體載體DNA進行轉染時，如果在平板培養基中加入X–gal和IPTG，由于β–半乳糖苷酶的α–互補性，可以根據是否呈現白色菌落（或噬菌斑）而方便地挑選出基因重組體。

使用方法

首先把X-gal配制成20 mg/ml的二甲基甲酰胺（DMF）溶液（-20℃避光保存），然后在100 ml的瓊脂培養基中，加入200 μl的上述溶液、100 μl的IPTG（24 mg/ml）和100 μl的Amp（100 mg/ml），制作成X-gal、IPTG、Amp平板培養基。當DNA片段插入至pUC系列載體（或其他帶有lacZ、Amp基因載體），然后轉化至lacZ缺失細胞中后，涂布上述的X–gal、IPTG、Amp平板培養基，可根據長出菌體的藍白色，而方便地挑選出基因重組體（白色為具有DNA插入片段的基因重組體）。

注意事項

1. 培養噬菌體時，Top agar中的添加量為：50 μl/3 ml（20mg/ml）。
2. 含有X-gal的培養基4℃避光保存，須在1~2周內使用。

參考文獻

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